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平板克隆實(shí)驗(yàn)
簡要描述：
平板克隆實(shí)驗(yàn)當(dāng)單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細(xì)胞群體，稱為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50以上的細(xì)胞，大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力，各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變，通過計(jì)數(shù)克隆形成率可對單個(gè)細(xì)胞的增殖潛力做定量分析，了解細(xì)胞的增殖能力和獨(dú)立生存能力。軟瓊脂培養(yǎng)或平板克隆是長用的方法。
更新時(shí)間：2026-03-20
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廠商性質(zhì)：其他
平板克隆實(shí)驗(yàn)
平板克隆實(shí)驗(yàn)形成項(xiàng)目介紹：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細(xì)胞群體，稱為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50以上的細(xì)胞，大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力，各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變，通過計(jì)數(shù)克隆形成率可對單個(gè)細(xì)胞的增殖潛力做定量分析，了解細(xì)胞的增殖能力和獨(dú)立生存能力。軟瓊脂培養(yǎng)或平板克隆是長用的方法。
一、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 細(xì)胞接種
消化對數(shù)生長期細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)。
按500~2000 個(gè)細(xì)胞 / 孔接種到 6 孔板中。
一般設(shè)：對照組、處理組，每組3 個(gè)復(fù)孔。
輕輕十字混勻，放入培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng)。
細(xì)胞密度根據(jù)細(xì)胞系調(diào)整：長得快、易克隆的種 500–1000；難克隆的 1000–2000。
2. 培養(yǎng)（關(guān)鍵）
繼續(xù)培養(yǎng) 7~14 天，每 2~3 天換一次液。肉眼看到明顯細(xì)胞克隆團(tuán)時(shí)即可終止。
3. 終止培養(yǎng)
棄培養(yǎng)基，用PBS 輕輕洗 1~2 次。
4. 固定
加入4% 多聚甲醛或甲醇，固定 15~30 min。棄固定液，PBS 洗一遍。
5. 染色
加入0.1%~1% 結(jié)晶紫染液，室溫染色 15~30 min。用清水緩慢洗掉多余染液，晾干。
6. 計(jì)數(shù)與計(jì)算
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