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細(xì)胞分選服務(wù)
簡(jiǎn)要描述:
細(xì)胞分選服務(wù)是指據(jù)細(xì)胞的屬性,講混合的細(xì)胞分為不同特性的幾個(gè)不同類群的方法,本公司運(yùn)用的是免疫磁珠細(xì)胞分選
更新時(shí)間:2026-03-20
訪問(wèn)量:1859
廠商性質(zhì):其他
一、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 制備單細(xì)胞懸液
消化貼壁細(xì)胞 / 處理組織,充分吹打成單細(xì)胞。
40~70 μm 濾網(wǎng)過(guò)濾,去除團(tuán)塊(防止堵針)。
離心棄上清,用分選緩沖液重懸。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)與濃度調(diào)整
濃度:1×10?~1×10? /mL
體積:根據(jù)分選量一般 100~500 μL / 管
3. 設(shè)對(duì)照管(必須!)
每組必須設(shè):
未染色細(xì)胞管(調(diào)電壓)
單陽(yáng)性對(duì)照管(調(diào)節(jié)補(bǔ)償)
同型對(duì)照管(排除非特異性結(jié)合)
4. 抗體染色
細(xì)胞懸液中加入熒光抗體,避光孵育:
室溫:20~30 min
或 4℃:30 min
加分選緩沖液洗滌,離心去上清。
重懸,再次過(guò)篩,上機(jī)。
5. 活死染色(可選)
上機(jī)前加入 7-AAD 或 PI,排除死細(xì)胞。
6. 上機(jī)分選
先跑未染色、單染管,調(diào)電壓、調(diào)補(bǔ)償。
圈選目的細(xì)胞群:
FSC/SSC 圈活細(xì)胞
去黏連、去碎片
根據(jù)熒光圈目標(biāo)群
接收管預(yù)先加入完q培養(yǎng)基 / 血清(保護(hù)細(xì)胞)。
選擇分選模式:
純度優(yōu)先(Purity)
富集模式(Enrich)
單細(xì)胞模式(Single cell)
7. 分選后處理
分選后離心,重懸培養(yǎng) / 提取蛋白 / RNA。
可復(fù)檢流式,檢測(cè)分選純度
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