穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

Name: 穩(wěn)定細(xì)胞株篩選
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簡要描述：

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選
通過慢病毒感染配合藥物篩選的方法獲得穩(wěn)定表達(dá)Oct-4-EGFP的LELA穩(wěn)定細(xì)胞株

更新時間：2026-03-20

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穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實驗原理外源基因在細(xì)胞中的表達(dá)可分為兩大類，一類是瞬時表達(dá)，一類是穩(wěn)定表達(dá)（又叫長久表達(dá)）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上，使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因。建立穩(wěn)定細(xì)胞株，一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的**對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素（hygromycin）、新m素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。

實驗流程1、載體構(gòu)建（表達(dá)質(zhì)粒載體、病毒載體）；2、轉(zhuǎn)染/感染；3、目的蛋白初步檢測；4、***篩選；5、目的蛋白再次檢測（定性/半定量）；6、單克隆細(xì)胞株穩(wěn)定性檢測。四、客戶提供培養(yǎng)好的細(xì)胞五、公司提供：基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株實驗周期：大約3-4月左右，具體需要根據(jù)細(xì)胞實驗內(nèi)容而定。